极高的灵敏度

在推荐浓度下使用时可以获得最强的 PCR 扩增信号。

PCR 抑制性极小

智能化的“按要求释放” DNA 结合技术使得 EvaGreen 对 PCR 的抑制远小于 SYBR TM Green I 。

和快速 PCR 兼容

对 PCR 干扰极小，从而极大的缩短了 PCR 延伸时间。

非常适合 HRM 分析

无“染料重分布”缺陷，兼容 PCR 后的高分辨率熔解曲线（ HRM ）分析。

兼容多重 PCR

在推荐浓度下使用时，无扩增子之间的染料迁移现象。

超强稳定性

在大部分生化条件下非常稳定，可在室温下储存并可反复冻融。

优越的兼容性

和 SYBR TM GREEN I 光谱相似,和各知名品牌的 qPCR 仪器兼容。 用 EvaGreen ^TM 替代 SYBR Green 1 ，毋须改变任何您目前使用的操作步骤和仪器设备。

EvaGreen ^TM 是一种用于实时定量 PCR （ qPCR ）的 DNA 结合染料。该染料的诸多优点使它远胜于 SYBR Green I 。除了有相似的光谱特性， EvaGreen ^TM 有三个主要特点使它区别于 SYBR Green I 。

首先， EvaGreen ^TM 对 PCR 的抑制性远小于 SYBR Green I 。因此，使用 EvaGreen ^TM 进行的 qPCR 实验可以使用快速 PCR 步骤（图 3 ）。同时， EvaGreen ^TM 在实验中可以使用较高的浓度，从而获得远强于 SYBR Green I 扩增信号（图 2 ）。较高浓度的 EvaGreen ^TM 也消除了“染料重分布”的缺陷，使 EvaGreen ^TM 既可用于多重 PCR ，也可用于高分辨率（高清晰）熔解曲线分析（ HRM ）（图 4 ）。该分析正被越来越多的用于 PCR 后的基因分型和异源双链分析 。由于 SYBR Green I 对 PCR 的抑制性，从而要求其使用浓度必须很低，因此 SYBR Green I 无法解决由低浓度造成的染料重分布问题，既不能用于多重 PCR 也不能用于 HRM 。同时，染料重分布问题也可能影响常规熔解曲线的可靠性，因为低熔点的 DNA 链可能由于这种原因而无法检测到 。

第二， EvaGreen ^TM 的稳定性极强。在正常的储存、操作和 PCR 过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里，也可以反复冻融。与之相反， SYBR Green I 不稳定而且降解后对 PCR 抑制性更强 。

EvaGreen ^TM 降低了细胞膜透性，因而比 SYBR Green 1 更加安全（图 6 ）。独立实验室的测试结果显示， EvaGreen ^TM 既没有诱变性也没有细胞毒性 5 。相反，虽然 SYBR Green I 本身诱变性很弱，但它在细胞中可能抑制了正常 DNA 的修复机制，使其有诱变增强作用 6 。考虑到 PCR 的广泛使用，其安全性应该足够重视。

BIOTIUM 公司现提供四种 EvaGreen ^TM 产品： EvaGreen ^TM 20 × (#31000) 可稀释 20 倍后用于 qPCR ； 25mM EvaGreen ^TM DMSO 溶液 (#31002) 作为高浓度储液，为熟悉染料的研究人员设计 qPCR 配方，开发新应用提供更大的灵活性； EvaGreen ^TM Msater Mix(#31003) 含有除引物以外所有扩增目的 DNA 所需成分； EvaGreen ^TM Basic Mix(#31001) 和 master mix 相似但不含聚合酶。

图 3. 比较 EvaGreen TM Master Mix 和 Power SYBR TM Master Mix （ ABI ）在 GAPDH 扩增中的效果。使用两步法通用循环条件，即 95 ℃ 下 15 秒以及 60 ℃ 下不同的退火 / 延伸时间（分别为 60 、 40 、 20 和 10 秒）。每个水平条代表 8 次实验中 Ct 值分布。数据显示，当把退火 / 延伸时间从 60 秒减为 10 秒时， EvaGreen TM Master Mix 只造成了 Ct 值约一个周期的延后，而 Power SYBR TM Master Mix 则造成了多达 5-6 个周期的延后以及重复性降低的现象。

EvaGreen,20x（比SYBR Green 1 效果更好的RT-PCR定量专用试剂，操作方法完全一样。）