产品名称 :

EvaGreen ^TM ( 用于实时 PCR, 20 倍浓缩 )

产品编号 :

31000

分子结构 :

产品受美国和国际专利保护 *

产品 特性 :

颜色和状态 :

室温下呈橙色液体

吸收 / 激发波长 ：

500/525nm (DNA 结合态 )

储存方法 :

• 长期储存在 -20 ° C 以下，避光 ;
• 4 ^o C 环境可保存 6 个月以上 , 常温可保存 3 － 4 个星期 ;
• 使用前用旋涡震荡仪震荡。

应用和推荐 配方 ：

该产品可用作 real-time PCR 定量专用荧光指示剂。用于任何一台 real-time PCR 仪上进行 PCR 反应可兼容原的 SYBR GREEN I 或 FAM 的设置。但是由于仪器的不同以及 SYBR GREEN I 波长不同， Ct 值会有微小的差别 ( ± 1) ，然而不论使用任何一台 PCR 仪， EVAGREEN 荧光信号均强于 SYBR GREEN I 。一般使用时将 EVAGREEN 稀释至 1X 浓度。 为了得到更高的荧光信号强度，根据所使用的聚合酶对其耐受程度的不同，可以选择性的提高 EVAGREEN 的浓度 5 倍至 4x.

使用 EvaGreen ^TM 进行实时 PCR 定量参考配方：

>> 实时 PCR 的反应步骤如下 ¹ :

• 5 ul 10x 无 Mg²⁺ Taq 聚合酶缓冲液
• 2 u l of 50mM MgCl ₂ ²
• 5 u l each of 2 mM dNTP
• 2.5 u l of 20X EvaGreen ³
• 1-5 单位的 Taq DNA 聚合酶 或热启动 Taq DNA 聚合酶 ⁴
• 0.1-1 u M 引物
• 加 Di-H₂o 至 50 u l.

>> 在 PCR 仪器中进行 PCR 反应， 至退火或合成期收集荧光数据。

说明：

1. 如果使用罗氏 LightCycler ，则需添加 BSA ；
2. 使用 EvaGreen ^TM PCR 反应， 最理想的 Mg²⁺ 浓度是 2.5 mM.
3. 移取前 , 将 EvaGreen 置于室温下 , 并用旋涡 震荡仪震荡 .Evagreen 相当稳定 , 但在长期低温保存状况下 , 会产生沉淀 . 但无论何种沉淀产生 , 只需加热并充分震荡即可溶解
4. 使用热启动的 Taq 聚合酶可以得到最好的结果

• * EvaGreen ^TM 商标及应用覆盖全球 .
• ** SYBR 属于 Molecular Probes 公司注册商标 .

first aid:

该产品可能是有害的 . 应避免长时间或重复光照 . 避免接触到眼睛 , 皮肤或衣服 . 使用后应立即彻底清洗 . 如果眼睛或皮肤接触到该产品 , 用大量的水冲洗接触部位 15 分钟，并立即就医。 万一 吸入或吞入该产品 , 应移至有新鲜空气处并立即就医。